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Desafios em Imunologia Tumoral

Livecyte 2 is a unique quantitative label free cell analysis system which delivers continuous tracking and analysis of individual cells within large populations, enabling users to gain a more realistic and comprehensive understanding of cell behaviour.

The study of cell behaviour and morphology is a fundamental aspect applied in Cell Biology to a wide variety of applications. Even more so if this study helps us to understand cell to cell behaviour using single-cell techniques and in living cells.

Applications such as cell growth and proliferation, healing studies, cell motility, oncology, toxicological studies, angiogenesis, stem cells, are key studies to understand how cells respond in different diseases or under the effect of drugs.

Livecyte 2 is presented as a kinetic cytometer where we can monitor the motion and morphology of each cell.

Livecyte 2 produces high contrast video at time-lapse using Phasefocus patented Ptychographic quantitative phase imaging (QPI) technology for a range of label-free assays that can be complemented with up to seven fluorescence channels.

Automated monitoring of even the most sensitive single cells quickly reveals subtle phenotypic differences in undisturbed cell populations.

Although cell division and growth are both tightly linked to cell cycle and its regulation, they remain distinct processes that can operate independently under some conditions. It can therefore be insightful to distinguish both processes during the same assay.

With the Livecyte 2, in a single label-free run, researchers are able to extract and analyse metrics such as cell count, confluence, number of mitosis events and dry mass (total or single cell).

If you want to know more about the LiveCyte 2 potential, check this recent application where QPI was used to study the effects of cytochalasin D, an actin polymerization inhibitor, on cell proliferation and growth using the A549 adenocarcinoma cell line as model.

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Caracterização de sub-populações em culturas primárias heterogéneas de células epiteliais da próstata de pacientes

LIVECYTE da PHASEFOCUS permite analisar e extrair parâmetros para caracterizar heterogeneidade em populações mistas de células cancerígenas. Isso possibilita a avaliação de terapias combinadas em culturas primárias de células cancerígenas.

  • Células epiteliais heterogéneas de cancro primário da próstata são visualizadas sem qualquer interferência.
  • A distinção de sub-populações em culturas complexas é efectuada com auxílio de uma análise multiparamétrica.
  • As sub-populações são classificadas e identificadas com fingerprints fenotípicas.

Download Livecyte brochure

As culturas primárias de células de pacientes estão a tornar-se cada vez mais populares nos ensaios pré-clínicos uma vez que proporcionam um modelo melhorado da heterogeneidade tumoral e representam a diversidade intra e inter-paciente de uma forma mais realista que as tradicionais linhas celulares. Para desenvolver tratamentos eficientes, cada uma das diferentes sub-populações celulares necessita de ser individualmente controlada. Como tal, terapias combinadas representam maior probabilidade de êxito que as monoterapias. Nesta nota de aplicação, é utilizada uma modalidade de aquisição de imagem sem perturbação da amostra para caracterizar a heterogeneidade em culturas primárias epiteliais da próstata originadas a partir de tecidos tumorais de pacientes.

Esta nota de aplicação demonstra não só a utilização do sistema LIVECYTE para aquisição de imagens de populações heterogéneas de células, mas também o processamento multiparamétrico dos dados extraídos para classificar e distinguir automaticamente sub-populações em culturas complexas. A natureza não interferente da técnica de QPI (Quantitative Phase Imaging), assegura que as culturas primárias de células são visualizadas sem nenhum comportamento foto-induzido adicional ou potenciais comportamentos originados pela marcação fluorescente. O sistema LIVECYTE é uma poderosa ferramenta no desenvolvimento de terapias combinadas em modelos de culturas heterogéneas de células cancerígenas de pacientes.

Se pretender aceder à nota de aplicação completa, clique aqui

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Independent Cell Proliferation & Cell Growth Analysis

Livecyte 2 is a unique quantitative label free cell analysis system which delivers continuous tracking and analysis of individual cells within large populations, enabling users to gain a more realistic and comprehensive understanding of cell behaviour.

The study of cell behaviour and morphology is a fundamental aspect applied in Cell Biology to a wide variety of applications. Even more so if this study helps us to understand cell to cell behaviour using single-cell techniques and in living cells.

Applications such as cell growth and proliferation, healing studies, cell motility, oncology, toxicological studies, angiogenesis, stem cells, are key studies to understand how cells respond in different diseases or under the effect of drugs.

Livecyte 2 is presented as a kinetic cytometer where we can monitor the motion and morphology of each cell.

Livecyte 2 produces high contrast video at time-lapse using Phasefocus patented Ptychographic quantitative phase imaging (QPI) technology for a range of label-free assays that can be complemented with up to seven fluorescence channels.

Automated monitoring of even the most sensitive single cells quickly reveals subtle phenotypic differences in undisturbed cell populations.

Although cell division and growth are both tightly linked to cell cycle and its regulation, they remain distinct processes that can operate independently under some conditions. It can therefore be insightful to distinguish both processes during the same assay.

With the Livecyte 2, in a single label-free run, researchers are able to extract and analyse metrics such as cell count, confluence, number of mitosis events and dry mass (total or single cell).

If you want to know more about the LiveCyte 2 potential, check this recent application where QPI was used to study the effects of cytochalasin D, an actin polymerization inhibitor, on cell proliferation and growth using the A549 adenocarcinoma cell line as model.

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Como melhorar a conceção de vacinas com nanopartículas através da técnica BLI

A potencial utilização de nanopartículas (NPs) para o desenvolvimento de vacinas e antigénios tem suscitado um interesse crescente devido às suas propriedades únicas. As NPs têm a capacidade de aumentar a estabilidade antigénica, controlar várias propriedades físico-químicas, e podem ser administradas através de diferentes vias.

A compreensão do tamanho do núcleo NP e a conformação dos ligantes são fundamentais para um ótimo desenvolvimento. A apresentação ligante, espaçamento, acessibilidade e estabilidade podem ser avaliados através da afinidade ligante e cinética de ligação ao alvo. A caracterização da afinidade e cinética ligante NP requer plataformas analíticas versáteis que possam abranger uma  variedade de construções e o número de interações que possam exigir uma investigação de forma a garantir a seleção de ótimas construções.

Nesta nota de aplicação poderá saber como o sistema Octet foi utilizado para otimizar o tamanho do núcleo de nanopartículas, melhorar a acessibilidade aos antigénios, determinar construções antigénicas e medir as respostas humoral desencadeadas pelos candidatos à vacina NP. Os sistemas Octet têm vantagens comprovadas para os criadores de vacinas NP:

  • Medir diretamente em amostras não purificadas – a plataforma sem fluidos Octet pode poupar tempo e oferecer uma maior flexibilidade no tipo de amostra;
  • Medir afinidades de ligação de NP e mais – compatível com pequenas moléculas até partículas semelhantes a vírus, capazes de afinidade e medidas quantitativas como o título;
  • Rápido rastreio, caracterização e desenvolvimento de ensaios – correr até 96 amostras simultaneamente.

Clique aqui para obter a nota de aplicação.

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Compare BLI, SPR, & ITC em Caracterização de Afinidades

Os métodos analíticos label-free de superfície, tais como Bio-Layer Interferometry (BLI) e Surface Plasmon Resonance (SPR) em conjunto com microCalorimetria (Isothermal Titration Calorimetry) e ELISA são amplamente utilizados para a caracterização cinética de interações biomoleculares e derivação das constantes de afinidade (KD) respectivas.

A plataforma BLI aborda cinéticas de ligação e análises quantitativas com um sistema avançado que dispensa o recurso à habitual microfluídica. De fácil utilização e com grande versatilidade no desenho experimental, os sistemas BLI possibilitam não só uma caracterização detalhada de uma interacção individual, como também ensaios de screening de elevado thoughput. Devido à variedade de biossensores disponibilizados pela Fortébio e à baixa manutenção requerida pelo sistema, a tecnologia BLI torna-se uma opção apelativa para o estudo de interacções entre biomoléculas.

Quando comparada com SPR e ITC, a BLI oferece vantagens que incluem:

  1. Reduzido volume de amostra e análise direta de sobrenadantes ou lises celulares;
  2. Interacção mínima do utilizador, reduzindo a variabilidade nos resultados;
  3. Detecção em tempo real, facilitando a resolução de problema e optimização do ensaio;
  4. Opção para a concepção de ensaios testando simultaneamente diversas condições de corrida.

Esta nota de aplicação da FortéBio resume exemplos reais da literatura comparando determinações de afinidade obtidos com as três tecnologias.

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Utilização do Dicroísmo Circular na investigação sobre a Covid-19

Utilização do Dicroísmo Circular na investigação sobre a Covid-19

A técnica de Dicroísmo Circular é utilizada principalmente para analisar a estrutura e estabilidade de macromoléculas biológicas, em particular de proteínas e DNA. Estes estudos são realizados na caracterização fundamental de proteínas/péptidos, mas também para a descoberta e desenvolvimento de novas terapias baseadas em proteínas (medicamentos originais) ou na produção de biossimilares destes.

Durante o desenvolvimento terapêutico é necessária uma ampla gama de técnicas de caracterização biofísica para apoiar tomadas de decisão informadas. O estudo e caracterização de pequenas alterações na estrutura de ordem superior (HOS) de macromoléculas é muito importante para a seleção e validação de targets e para o screening e otimização de potenciais candidatos. As modificações na HOS podem afetar significativamente o desempenho das bioterapêuticas e a sua imunogenicidade.

Os equipamentos Chirascan da Applied Photophysics permitem efetuar comparações da HOS estatisticamente validadas, assegurando a identidade, a pureza e a estabilidade de moléculas complexas em diferentes etapas – estudos de pré-formulação, desenvolvimento de formulações e produto final.

Até à data, e ao mesmo tempo que segue a busca para uma vacina contra a Covid-19, procuram-se também targets adequados para desenvolvimento de antivíricos eficazes. A polimerase viral é um dos targets mais promissores. Veja aqui como o Dicroísmo Circular complementa outras técnicas analíticas na caracterização das subunidades da polimerase SARS-COV e SARS-COV-2.

Saiba mais sobre a gama Chirascan da APLChirascan Platform Brochure.

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Potencial dos lavadores de microplacas na rotina laboratorial

Várias notícias em todo o mundo colocam em perspectiva o objectivo de testar intensamente para o SARS-CoV-2. Actualmente, a principal preocupação continua a ser a procura de indivíduos infectados através dos testes de qPCR, que detectam a presença do material genético do vírus (RNA) num esfregaço da orofaringe.

O desafio seguinte, já recomendado por muitas autoridades sanitárias, é procurar a presença de anticorpos específicos no sangue. Os testes serológicos podem desempenhar um papel fundamental na luta contra a COVID-19, ajudando os profissionais de saúde a identificar indivíduos que tenham superado uma infecção no passado e desenvolvido uma resposta imunitária.

Alguns dos testes serológicos já em uso ou em processo de aprovação, são baseados no método de ELISA. São efectuados em laboratório e podem ser qualitativos ou quantitativos. No contexto da COVID-19, testam-se com maior frequência os anticorpos dos doentes (IgG e IgM).

Considerando que num futuro próximo a realização destes testes será estendida à generalidade da população, será inevitável um tremendo aumento na necessidade de microplacas bem como de instrumentação auxiliar ao processamento de amostras e testes.

Na maioria dos casos, os testes ELISA e outros ensaios em microplaca (bioquímicos, celulares) requerem sucessivas lavagens durante a sua execução. Ainda assim, porque não produzem directamente o resultado final de um ensaio, os lavadores de placas não são devidamente valorizados no processo. Em alguns casos, será mesmo ignorado como o desempenho e reprodutibilidade nas lavagens pode afectar significativamente os resultados finais.

Em comparação com as alternativas manuais, os lavadores de microplacas melhoram em muito a velocidade e precisão de muitos procedimentos de lavagem diferentes, poupando tempo e dinheiro no laboratório.

Para mais informação sobre lavadores de microplacasELISA workstations leitores ELISA  carregue aqui.

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Inovação em Instrumentação e Reagentes de Biologia Molecular

Bioneer, a primeira empresa coreana de biotecnologia, oferece desde 1992 soluções inovadoras na área da biologia molecular e biotecnologia. Equipada com diversas tecnologias proprietárias desenvolvidas in-house, não só se dedica à produção de oligonucleótidos, polimerases e kits de diagnóstico molecular, como também a instrumentação associada.

No atual contexto da pandemia causada pelo SARS-CoV-2, a Bioneer destaca-se com a mais completa gama produtos: Extração automática de DNA/RNA, qPCR, PCR convencional, Síntese de proteínas in vitro e kits de extração e amplificação validados para diagnóstico de COVID-19.

Conheça melhor as soluções:

Família Exiprep™ – extração automatizada de DNA, RNA e proteínas em 16, 48 ou 96 amostras em simultâneo

Exicycler™96 – termociclador para qPCR com sistema óptico patenteado e otimizado para melhor sensibilidade e reprodutibilidade através de luz polarizada

ExiProgen™ – síntese in vitro automatizada de proteínas a partir de DNA codificante em apenas 6 horas

Contacte-nos para mais informações

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Medição da Viscosidade de uma Formulação com Proteínas

Com os avanços no desenvolvimento de formulações, a sua complexidade decorre também da necessidade de proporcionar maior estabilidade aos produtos biológicos que tendem a sofrer agregação, desaminação, desnaturação, hidrólise ou oxidação também se alterou drasticamente devido à complexidade das formulações de medicamentos biofarmacêuticos e à necessidade de formulações muito concentradas e à indicação das autoridades reguladoras para não injectar grandes volumes subcutâneos; a viscosidade pode atingir valores bastante elevados.

A viscosidade elevada das formulações afecta a força necessária para injectar a solução utilizando agulhas adequadas, bem como o tempo necessário para completar a injecção. Ambos os parâmetros têm um forte impacto na aceitação e adesão à terapêutica por parte dos pacientes.

Os viscosímetros VROC®, da Rheosense®, fornecem resultados de viscosidade precisos e fiáveis, indispensáveis para compreender o comportamento dos anticorpos e outras proteínas. Ao incluir uma ampla gama de viscosidades e taxas de deformação, pode obter-se uma conhecimento bastante completo sobre as formulações.

A Rheosense preparou uma nota de aplicação dedicada à medição da viscosidade de uma formulação com proteínas e correlaciona-a com a força da injeção e outras variáveis como o calibre da agulha da seringa. Clique para fazer o download da Nota de Aplicação.

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Avanços no desenvolvimento de vacinas e terapêuticas contra a COVID-19

Declarada pandemia a 11 de Março pela Organização Mundial da Saúde, a COVID-19 já infetou milhões de pessoas e causou centenas de milhares de mortos. A sua rápida disseminação e os seus efeitos desastrosos tornam indispensável uma solução para esta pandemia. Como tal, investigadores de todo o mundo, munidos de avançadas tecnologias bioquímicas e analíticas, empenham-se na busca de um tratamento. São estudados os mecanismos de infecção, interacções envolvidas entre vírus e células e possíveis agentes que impeçam este processo. São caracterizados e testados inúmeros candidatos que, em última instância, conduzirão a uma vacina ou terapêutica eficaz.

Estudos sobre COVID-19

A tecnologia BLI (Bio-Layer Interferometry) juntou-se a este desafio contribuindo para que os investigadores compreendessem melhor este vírus e acelerando a investigação para o desenvolvimento de uma vacina eficaz. A Fortébio destaca aqui alguns dos estudos mais relevantes (áreas da biologia, vacinas e terapêuticas antivíricas) onde as plataformas BLI Octet foram utilizadas para investigação relacionada com o novo coronavírus.

Clique aqui para obter mais informações sobre o Octet RED96e.